从黑龙江小兴安岭棕背和花鼠分离到莱姆病螺旋体

目的：为初步掌握黑龙江省小兴安岭林区动物莱姆病分布情况。方法：于1995年7月用鼠笼捕获野鼠30只，采用间接免疫荧光抗体法调查鼠血清抗莱姆病螺旋体抗体。用BSK培养基从鼠脏器分离病原。结果：阳性共8只，阳性率26.67％；其中优势种属野鼠阳性率达31．36％；从棕背和花鼠各分离出1株莱姆病螺旋体。新分离株的单克隆抗体反应与国内分离株SR1相同，与美国B(31)有区别，对H(6831)呈阴性反应。结论：鼠型啮齿动物可能是莱姆病螺旋体的动物宿主，属野鼠则是重要动物宿主。     

用鸡胚卵黄囊分离斑点热群立克次体的研究

本文在用传统的实验动物感染法分离立克次体同时，并尝试用鸡胚卵黄囊培养法直接分离立克次体。结果：用前者未分离出立克次体，而用后者分别从来自北京昌平县的中华革蜱和来自黑龙江省虎林县的嗜群血蜱中各分离到1株立克次体。经鉴定，这两株立克次体属于斑点热群立克次体。结论：鸡胚卵黄囊培养法可以直接从现场节肢动物标本中分离病原体。     

幽门螺杆菌的冷冻干燥保存方法

目的介绍一种较理想的幽门螺杆菌（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒｐｙｌｏｒｉ，Ｈｐ）的冷冻干燥保存方法，希望对Ｈｐ相关研究有所帮助．方法以１００ｇ／Ｌ蔗糖、５００ｍＬ／Ｌ小牛血清作为冻干保护剂对１５株Ｈｐ（１０１３ｃｆｕ／Ｌ菌液）和３株空肠弯曲菌进行冷冻干燥保存，同时用脱脂牛奶冻干保护剂作为对照．按常规菌株冻干程序冻干后火焰封管，真空放电检查冻干管真空度良好后，存放于室温环境，用于冻干效果观察．冻干菌株每年进行复活检查，复活时接种双份布氏血平板，置混合气体环境（１００ｍＬ／ＬＣＯ２，５０ｍＬ／ＬＯ２和８５０ｍＬ／ＬＮ２）培养５ｄ后观察细菌复活情况．结果Ｈｐ冻干菌株１５株经４ａ复苏观察发现均存活良好，其中已有２株冻干菌株观察时间已达６ａ，仍存活良好．结论以蔗糖血清为主的冻干保护液在Ｈｐ菌株冻干中具有良好的保护效果，冻干菌株可达到长期保存的目的．同时，此保护剂可有效用于弯曲菌属细菌和其他螺杆菌属细菌的冻干保存     

幽门螺杆菌对胎儿胃粘膜上皮细胞的粘附用研究

实验选用６至７个月龄的脑儿胃粘膜组织进行有关幽门螺杆菌（Ｈｐ）的粘附部位及菌株间粘附能力差异的研究，发现ＣＡＰＭＤ３２株与ＮＣＴＣ１１６３７株的粘附部位相似，Ｈｐ对胃窦及胃体下部粘膜组织具有很强的粘附能力，而对胃体上部及胃底部粘膜组织的粘附能力很差或不能粘附；而ＣＡＰＭ Ｚ－４株则对胃体、胃窦及胃底部粘膜上皮组织均表现出很强的粘附能力；表明Ｈｐ的粘附存在明显的部位特异性，不同Ｈｐ菌株间在粘附同一胎儿胃粘膜组织时表现出明显的差异，Ｈｐ与胃粘膜上皮细胞间的粘附过程比较复杂，至少包括两种类型，参与Ｈｐ粘附的粘附素和相应受体不止一种。结果提示Ｈｐ相关性慢性胃炎的好发部位及严重程度除与人胃粘膜组织不同部位细菌粘附受体的表达存在明显的差异外，还决定于Ｈｐ的粘附素的种类和粘附特性。不但首次在机体和细菌两个方面揭示了Ｈｐ相关性慢性胃炎的发病规律，也为进一步开展该菌疫苗的研制、开展对Ｈｐ感染及其相关疾病的防治提供了重要线索。     

幽门螺杆菌生物学特性、致病性及其应用

自1983年澳大利亚学者Warren和Marshall在人的胃粘膜标本中分离出幽门螺杆菌(Helicobacter py-lori,简称HP)以来,十多年来世界各国学者相继对此进行了研究,现已明确该菌是慢性活动胃炎和消化性溃疡的重要病因。感染HP后,有的发生胃炎,也有发生消化性溃疡,而也有最终导致胃癌的发生。自1989年以来,我们进行了有关幽门螺杆菌的研究工作,主要分四部分进行,现重点分述如     

幽门螺杆菌cagA基因 PCR检测方法初探

目的 建立敏感性高的幽门螺杆菌菌株cagA基因PCR检测方法,为客观评价CagA在我国幽门螺杆菌感染致病中的作用提供基础。方法 通过分析比较GenBank中已知的cagA基因序列,设计了一对针对cagA基因保守序列,可扩增297bp片段的PCR引物,用PCR方法检测幽门螺杆菌的cagA基因,与SDS-PAGE检测CagA蛋白的结果进行比较。结果 PCR检测82株国内幽门螺菌杆菌的cagA基因,77株为cagA阳性,阳性率为93.9%,SDS-PAGE显示包括所有PCR扩增阴性菌株在内的74株幽门螺杆菌均表达CagA,阳性率为100%,PCR检测cagA基因的敏感性为93.2%。结论 建立了敏感性高的幽门螺杆菌cagA基因PCR检测方法。     

从粤东丰溪自然保护区白腹巨鼠和褐家鼠体内分离出莱姆病螺旋体

目的：探讨鼠类携带莱姆病螺旋体情况。方法：用ＢＳＫ培养基分离病原、单克隆抗体鉴定。结果：从白腹巨鼠和褐家鼠体内分离出２株疏螺旋体,经用莱姆病螺旋体种属特异的单克隆抗体进行间接免疫荧光抗体试验,证实均为莱姆病螺旋体,命名为ＭＤ２１和ＭＤ５５。结论：首次从病原学证实鼠类为粤东地区莱姆病螺旋体的主要宿主动物。     

布鲁氏菌病及其防制

布鲁氏菌病(Brucellosis)(简称布病)是布鲁氏菌属(Brucella)(简称布氏菌)的细菌侵入机体引起的传染-变态反应性的人畜共患的传染病。早在19世纪后期人们就认识了这种疾病,迄今已一百余年。一、布鲁氏菌病:1.布氏菌属:布氏菌属是由6个种,19个生物型组成:羊种布氏菌(B.melitensis)有1、2、3型,牛种布氏菌(B.abortus)有1、2、3、4、5、6、7、9型,猪种布氏菌(B.suis)有1、2、3、4、5型,犬种布氏菌(B.canis)、绵羊附睾种布氏菌(B.ovis)和沙林鼠种布氏菌(B.neotomae)各有一个生物型。虽然,它们同在一个属内,但其毒力、生物学性状、感染人畜后…     

我国腹泻病患者和家畜家禽粪便标本中携带小肠结肠炎耶尔森氏菌HPI毒力岛的大肠杆菌的调查

目的　了解携带小肠结肠炎耶尔森氏菌HPI毒力岛的大肠杆菌在我国腹泻病患者粪便标本、动物粪便标本及部分食品标本中的存在情况和所致腹泻病的临床特征。方法　使用菌落原位杂交、DNA打点杂交和PCR扩增等方法。结果　在各地送检的从腹泻病患者粪便标本中分离到的、用常规方法不能鉴定的大肠杆菌中 ,均检出带有小肠结肠炎耶尔森氏菌HPI毒力岛的大肠杆菌菌株 ,检出率为 2 7.0 5 % (436 / 16 12 )。从市售食品标本中分离的大肠杆菌中 ,携带小肠结肠炎耶尔森氏菌HPI毒力岛的大肠杆菌的检出率为 10 .2 3% (9/ 88)。从家畜家禽粪便中分离的大肠杆菌中 ,携带小肠结肠炎耶尔森氏菌HPI毒力岛的大肠杆菌检出率为 5 .71% (16 / 2 80 )。携带小肠结肠炎耶尔森氏菌HPI毒力岛的大肠杆菌所致腹泻的典型临床表现为食欲不振、腹痛、寒战乏力、正常体温或低热、每日腹泻多在 6次以上、多为粘液便。结论　携带小肠结肠炎耶尔森氏菌HPI毒力岛的大肠杆菌在我国分布广泛 ,检出率高于其他几类致泻性大肠杆菌 ,对我国人民的健康是一个潜在的威胁     

引起成人腹泻的新轮状病毒在原代人胚肾细胞上的培养和传代

目的 探讨用细胞培养系统在体外培养新轮状病毒（RV）。方法 含新RV的病人粪便标本经高浓度胰蛋白酶（100μg/ml)37℃作用1h,接种于原代人胚肾（PHEK）细胞,37℃吸附1h后,补加无血清含胰蛋白酶（100μg/ml）的DMEM,37℃转鼓培养3d,收获细胞培养液,冻融1次,作为下一代培养的接种物,培养传代。用聚丙烯酰胺凝胶电泳、免疫荧光（IF）、电镜（EM）、免疫电镜（IEM）等方法对细胞培养液进行病毒核酸、抗原及形态检查。结果 从10份粪便标本中培养分离到1株病毒,定名为J19。该病毒在PHEK细胞上稳定培养传代（28代）,其病毒核酸（dsRNA）电泳图型与初始用于接种细胞的粪便标本中的dsRNA电泳图形完全一致,而与A、B、C组RV dsRNA电泳图型明显不同。J19株感染的细胞与病人恢复期血清呈IF阳性反应,与成人腹泻轮状病毒（ADRTV）腹泻病人恢复期血清、兔抗A组RV和兔抗ADRV血清均为IF阻性;EM和IEM在该病毒的细胞培养液中观察到,在形态上与初始接种物中病毒一样的轮状病毒颗粒,而且可被新RV腹泻病人恢复期血清凝集,结论 成功地从含新RV的成人腹泻粪便标本上分离培养出1株轮状病毒－－J19,并能在细胞稳定传代。J19株不属于A、B、C组RV,而是一种新RV。关于新RV在细胞上培养传代,本文是第一次报告。